96孔板的每個(gè)孔中加入100微升細(xì)胞懸浮液。 從底部附近的井的左側(cè)添加細(xì)胞懸浮液。 加入一半平板后,混合細(xì)胞懸液,不要再加入,繼續(xù)加入剩余的一半平板。 添加完所有板后,蓋上板,用左手輕輕握住板的左側(cè),用右手輕輕輕敲板的右邊緣,注意抓力(我通常輕敲三次)。 如果它太強(qiáng)或太多次,細(xì)胞就會(huì)被濃縮和堆積。 順時(shí)針旋轉(zhuǎn)盤子(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余的三面,靜置約5分鐘,放入37度培養(yǎng)箱中。
加入細(xì)胞懸液后,抬起細(xì)胞培養(yǎng)板,從底部向上觀察光線,看細(xì)胞是否聚集。然后從底部敲擊以分散它。如果實(shí)驗(yàn)室有平板振蕩器,建議用這個(gè)儀器輕微振蕩。 效果好,即振幅小、頻率高。細(xì)胞應(yīng)該盡可能分散,大多數(shù)細(xì)胞處于單一狀態(tài)。離心后,轉(zhuǎn)移到六孔板上的,就是震動(dòng)!搖晃時(shí),不要讓細(xì)胞液轉(zhuǎn)向,否則細(xì)胞會(huì)全部被帶到中間而不均勻!
96孔板保養(yǎng):
1.為保證本酶標(biāo)儀持續(xù)的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性,應(yīng)避免干擾光學(xué)系統(tǒng)的任何部件。
2.保持光學(xué)系統(tǒng)的清潔,以確保正常功能和結(jié)果的準(zhǔn)確,避免任何液體流入儀器內(nèi)部。應(yīng)防塵、防止其它外源性物質(zhì),不用手指觸摸透鏡表面、濾光片、光電檢測器。
3.1儀器日常清潔。
3.2關(guān)掉儀器開關(guān)應(yīng)拉掉電源插頭。
3.3使用一次性手套,用一次性擦布沾水或溫和去污劑,清潔儀器外部、導(dǎo)軌和板架。
3.4嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,如儀器出現(xiàn)故障,應(yīng)馬上退出檢測狀態(tài),立即向保管人員或科室負(fù)責(zé)人報(bào)告,查明原因,及時(shí)處理,不得擅自”修理”,并做好使用和故障情況登記及實(shí)驗(yàn)記錄。